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分享一下NEST细胞培养过程中出现哪些问题
点击次数：1425 更新时间：2020-09-21
NEST细胞培养对它不了解的朋友可能会觉得它很神秘，其实它的秘密很简单，一个24孔板中一个大孔中包括1200个400um的倒置微孔，能将捕获的单个iPS培养成类胚体，可以培养50至3000个一样大小的细胞团!当你向培养板中加入细胞时，细胞会均匀的落入每个微孔孔中！它广泛的应用于iPS/ES培养成类胚体！
下面我就来给大家分享下NEST细胞培养过程中出现的问题：
一、细胞成长曲线测守时为什么要做重复孔?
答：测定细胞成长曲线细胞计数时挑选3个复孔，每孔分别计三次，取其平均值，目的是减小操作差错。
二、为什么制作的细胞成长曲线没有到达平台期?
答：可能有以下原因：一是细胞接种密度过低;二是细胞培育时刻过短;三是细胞成长状况欠好，使其不能正常增殖。
三、怎么挑选细胞接种数?
答：可根据细胞传代培育过程中接种数及细胞成长周期进行核算，细胞接种数因细胞的不同而不同。
四、细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?
答：参加台盼蓝后，活细胞不上色，台盼蓝上色的细胞呈深蓝色，是不健康或已死亡的细胞，不能计数。
五、测定细胞成长曲线的含义是什么?
答：细胞成长曲线是测定细胞肯定成长数的常用办法，也是断定细胞生机的重要目标，是培育细胞生物学特性的基本参数。由于细胞太小，无法测单个细胞的成长状况，所以测细胞集体的成长曲线。
六、细胞成长曲线测定周期是几天?
答：一般是一个星期。
七、细胞成长曲线还有其他办法制作吗?
答：当然有。我们说到较多的是直接计数的办法，除此以外还有相对计数的办法，该类办法首先要制作规范曲线，标定细胞数和某个变量的函数，然后我们只需要测定每天这个变量的值便能够核算出细胞数。常用的是MTT、CCK8等比色的办法。
八、为什么细胞计数多天，细胞数没有添加反而削减?
答：一般细胞传代后，会有一个成长缓慢的潜伏期，细胞不增殖，而细胞会有正常的死亡，故细胞数不添加反而削减。
