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NEST 801008 爬片 12孔 适用于细胞培养板 100个/包

NEST 801008 爬片 12孔 适用于细胞培养板 100个/包

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报    价: 230
更新时间: 2023-08-14
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详细资料:

NEST 801008 爬片 12孔 适用于细胞培养板 100个/包

商品名称:爬片

商品货号:801008

品牌:耐思  NEST

规格:100个/包

NEST 801008 爬片 12孔 适用于细胞培养板 100个/包

一、爬片的准备

        1.爬片可用一般的盖玻片,也可用爬片;本公司*的爬片不防一试,适合多种细胞的爬片。

        2.应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮,或者是口腔科的那种小沙轮,轻轻划一下后,稍用力一掰就分开了。 如果接种大皿的话,我一般不将盖玻片切开,直接清洁后放入培养皿中,到染色时再将之切开,这样既保证了细胞均一性,又可同时做几个指标的染色。

        3.将剪裁好的爬片,置于浓硫酸中浸泡并guoye,第二天先用自来水冲洗20遍,再置于无水酒清中浸泡6小时,再用三蒸水冲洗3遍(个人认为主要目的是将酸冲洗干净就可以了,如果不干净的话,细胞帖壁不好),放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒。

        4.高压后取出放入烤箱中烤干,备用。烤干后可放入超净台中。

        5.关于多聚赖氨酸,很多人都将玻片用此处理,以使细胞与玻片结合更牢。但我在做爬片时从来没用过多聚赖氨酸,细胞贴壁仍然很好,且在做后续的免疫细胞化学染色、TUNEL等凋亡检测、免疫荧光等也从未脱过片。

  二、细胞爬片

        1.胰酶消化细胞后计数重悬细胞于*培养基中。

        2.加细胞时,根据玻片的大小,先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基,目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起,然后放玻片,防止加细胞悬液时玻片漂起,造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。

        3.根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

        4.待细胞贴壁后,可去上清加含药培养基。

        5.按照实验设计,作用一定时间后取玻片。取玻片时由于玻片与培养皿底结合较紧,张力较大,我一般将注射器针头针尖向背面弄个小钩,这样将爬片轻轻勾起,用小镊子取出就可以了。如果要做诸如24h,48h,72h等这样时间点的实验的话,将所需数量的爬片取出时应用酒精灯火焰烧一下针头和镊子。末取出的可接着继续培养。

 三、细胞爬片的固定

          细胞爬片取出后,一般用PBS洗2遍,然后再做固定。当然,根据研究目的,PBS洗也不是一定要做的,比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗,因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落。

         另外在保存细胞爬片的时候,我一般用培养皿或板,先在皿底放一层面巾纸,然后再放爬片,这样方便做实验时取片。然后盖上盖子,并在盖子上做标记,为避免混淆,可用透明胶带将盖子和皿连在一起。一般-20℃保存2-3个月的片子做免疫组化是没有问题的。

上海点睿仪器仪表有限公司一家专注于生命科学领域的产品渠道商和技术服务商。公司由几位海外留学多年的回国人员,于2011年3月创立,2013年销售额突破2000万元。公司致力于向客户提供*的产品、*化的解决方案和高品质的专业服务,并承担起生物科学产业助推器的历史使命,服务并推动生命科学事业的发展。优秀的员工、科学的管理、高效的营运、全面的信息网络、雄厚的资金、多年的行业经验和进步的经营理念,是我们服务于客户、奉献于社会、实现历史使命的基础和保证。

 

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